4-Nítreafheinil béite-D-galactopiranoside CAS: 200422-18-0

Éifeacht: Is foshraith é ONPG a úsáidtear go sonrach chun láithreacht agus gníomhaíocht an einsím β-galactosidase a bhrath. Nuair a bhíonn einsím β-galactosidase i láthair agus gníomhach, scoilteann sé ONPG ina dhá tháirge: o-nítreafheinól agus díorthach galactóis. Mar thoradh ar scaoileadh o-nítreafheinóil bíonn athrú datha buí ann, agus is féidir é sin a thomhas ag baint úsáide as speictreafótaiméadar.

Feidhmchlár: Tá roinnt feidhmeanna ag ONPG i dtaighde bitheolaíochta móilíní agus bithcheimice:

Cinneadh gníomhaíochta β-galactosidase: Úsáidtear ONPG go coitianta chun gníomhaíocht einsím β-galactosidase a thomhas agus a chainníochtú. Is féidir ráta foirmithe o-nítreafheinóil, atá comhréireach go díreach le gníomhaíocht an einsíme, a thomhas go speictreafótaiméadrach.

Léiriú agus rialáil géine: Is minic a úsáidtear ONPG i dturgnaimh a bhaineann le staidéir ar léiriú agus rialáil géine. Úsáidtear go minic é in anailísí próitéine comhleá, amhail an córas comhleá lacZ a úsáidtear go coitianta, chun léiriú géinte faoi rialú tionscnóirí sonracha a staidéar. Tugann an ghníomhaíocht béite-galactosidase a thomhaistear ag baint úsáide as ONPG léargas ar leibhéal an léirithe géine.

Scagthástáil le haghaidh gníomhaíochta β-galactosidase: Is féidir ONPG a úsáid mar mhodh scagthástála dathmhéadrach i dteicneolaíocht athchuingreach DNA chun láithreacht agus feidhmiúlacht an ghéin LacZ, a chódaíonn β-galactosidase, a aithint. Cuidíonn an modh scagthástála seo le clóin ina bhfuil an ghéin spéise a aithint.

Staidéir chinéitice einsíme: Tá ONPG úsáideach freisin chun cinéitic einsím β-galactosidase a staidéar. Trí ráta imoibriúcháin einsím-substráit a thomhas ag tiúchain éagsúla substráit, is féidir paraiméadair chinéitice amhail tairiseacha Michaelis-Menten (Km) agus uasrátaí imoibriúcháin (Vmax) a chinneadh.